求Na2Cl2的结构示意图

易金矿业网 2023-06-26 10:27 编辑:admin 138阅读

求Na2Cl2的结构示意图

二聚体或称双体、二聚物在不同领域中有不同意义,但基本涵义都表示相同或同一种类的物质,以成双的型态出现,可能具有单一状态时没有的性质或功能。

化学上,凡是两个分子结合成一个新的物质,无论是物理作用还是化学变化,都可以将生成的物质称为二聚体。常见的例子包括二聚氯化亚铜、二聚氯化铝、二乙烯酮、气态的二聚羧酸、二聚环戊二烯、二聚环丁二烯等等。它可以是聚合物中的一种特例,例如蔗糖由葡萄糖和果糖单元缩合组成,则蔗糖虽为一个分子,仍归属为一种二聚体。

生物化学和分子生物学中所探讨的双体通常是如同蛋白质、核酸等可观察的高分子,在形成的过程中,若两个次单元(subunit)相同称为同源二聚体(homo-),若是不完全相同的单体组合而成,则称为异源二聚体(hetero-)。生化所探讨的双体若以共价键方式连结,则通常使用双硫键连结单体,而绝大多数却不是以共价键的方式组合而成,例如核糖体。再例如嘧啶二聚体,通过紫外线照射,DNA或RNA上相邻的嘧啶以共价键相互结合,为紫外线的生物学作用为主要原因。通过光,恢复酶的催化作用,吸收光后再恢复为单体。

二代测序数据中的PCR duplication是什么,是怎么产生的?

是引物的3'端间相互错配扩增形成的。引物二聚体的出现是必然的,只是或多或少的问题,电泳时看不到引物二聚体带也不代表没有二聚体出现,只是含量低我们的肉眼看不到而已。提高PCR严谨性(包括提高退火温度,降低引物浓度等)可大大降低二聚体的浓度。

减少PCR产物中引物二聚体的方法:

1从引物自身着手,重新设计引物,这是最根本解决这一问题的办法;

2.可能模板有问题;模板浓度过小,适当加大模板量;

3.Taq酶,引物,Mg2+浓度可能过高,可降低它们的浓度;

4.取你所要加的上下游引物混合后,在100摄氏度下的沸水中煮5分钟,然后迅速拿出至于冰块之上瞬时冷却,这时再加入反应体系当中,引物二聚体就会消失的;理由:引物可能会发生发夹结构,自身环化等结构,在100摄氏度下的沸水中煮5分钟可使引物变为单链,以减少二聚体。不过有人认为在 PCR仪上95度变性5min也同样达到目的,而且成功试过通过延长退火时间也可以消除引物二聚体。

5.所配MIX中加5%的甘油或者5%的DMSO,可以增强特异性;

6.PCR反应体系的配制在冰上进行,最后加TAq酶,PCR结束后,产物勿放置在室温下过长时间,有人认为室温下有些TAQ酶会将多余的引物合成为二聚体。

7.增加循环数;

8.降低退火温度后有条带,则应逐渐提高温度,若提高温度的同时产物量减少,则考虑增加镁离子浓度(根据扩增片断长度而定,片段长则相应镁离子浓度应该高一些);

9.若降低退火温度,发现还是只有引物二聚体,而且镁离子的浓度在20-25mmol/l没有区别,则考虑 Buffer等试剂没有完全融解、混匀,导致吸取的试剂浓度不对。

10. 以上次的PCR产物作模板二次PCR,可以提高引物与模板的特异性,减少引物二聚体,如果两次时间间隔短的话,可以把原产物稀释100-1000倍,如果间隔较长可以稀释50-100倍。

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